大家都知道IPTG【CAS:367-93-1】在生物實驗室的用途非常廣泛，那么這個在生化研究領(lǐng)域，這個人人知曉的IPTG到底有哪些用途呢？下面小編為大家介紹下吧！
1.IPTG主要用作誘導(dǎo)劑，誘導(dǎo)蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)乳糖操縱子表達(dá)。
2.IPTG通常和X-GAL【CAS：7240-90-6】一起搭配使用，用于藍(lán)白菌落的篩選。
3.IPTG也用在發(fā)酵提取，細(xì)胞培養(yǎng)中。
4.IPTG還可以用在疫苗研發(fā)、大腸桿菌表達(dá)目標(biāo)蛋白、細(xì)胞重組表達(dá)等研究中。 IPTG誘導(dǎo)原理
首先
E. coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙?；D(zhuǎn)移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調(diào)節(jié) 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結(jié)合，使操縱子（元）受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結(jié)合位點。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位點共同構(gòu)成lac操縱子的調(diào)控區(qū)，三個酶的編碼基因即由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié)，實現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達(dá) 。
其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處于阻遏狀態(tài)。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達(dá)的Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄啟動。當(dāng)有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導(dǎo)。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導(dǎo)劑并非乳糖本身。乳糖進入細(xì)胞，經(jīng)β-半乳糖苷酶催化，轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘恰：笳咦鳛橐环N誘導(dǎo)劑分子結(jié)合阻遏蛋白，使蛋白構(gòu)象變化，導(dǎo)致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉(zhuǎn)錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與異乳糖相同，是一 種作用極強的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應(yīng)用。 使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
 
作用
誘導(dǎo)外源基因的表達(dá)，普遍應(yīng)用于原核表達(dá)系統(tǒng)，使其表達(dá)量增高，產(chǎn)物穩(wěn)定，具有易鑒定，易純化的優(yōu)點。
 
匯百試劑作為國內(nèi)大型糖苷系列產(chǎn)品生產(chǎn)商，向廣大科研單位供應(yīng)純度99%~101%的高純度IPTG。經(jīng)多次會議商討改良，匯百試劑目前完成IPTG【367-93-1】進一步技術(shù)純化。目前匯百試劑IPTG擁有工業(yè)級，試劑級，醫(yī)用級三個級別。
 
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